大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于如何选择限制性内切酶的问题，于是小编就整理了3个相关介绍的解答，让我们一起看看吧。
哪些限制性内切酶好用？
限制酶都好用的。
限制酶和内切酶的区别？
限制性内切酶全称限制性核酸内切酶，是一种能将双股DNA切开的酶。切割方法是将糖类分子与磷酸之间的键结切断，进而于两条DNA链上各产生一个切口，且不破坏核苷酸与碱基。限制酶在分子生物学与遗传工程领域有广泛的应用。
内切酶，即限制性核酸内切酶。亦称限制性核酸酶。它是一种能催化多核苷酸的链断裂的酶，只对脱氧核糖核酸内一定碱基序列中某一定位置发生作用，把这位置的链切开。通过内切酶可以把某一个遗传基因切下来，若再连在别的细胞的遗传基因上，便可使这细胞具有新的遗传特性。内切酶的发现和采用，使基因工程成为可能。
区别：含义不同，作用不同。
一、含义不同：
核酸内切酶：在核酸水解酶中，为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶，与核酸外切酶相对应。
核酸外切酶： 核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。
二、作用不同：
核酸外切酶的作用：从核酸链的一端逐个水解下核苷酸。限制性核酸内切酶的作用：识别特定的核苷酸序列，并在DNA分子内部的一定位点切割DNA 。
核酸内切酶：大都不具碱基特异性，但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。
把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计？
方法非常多，列举一两个：
1.
不同的粘性末端不能相连。所以，如果要相连，就要去除不同的粘性末端，进行平末端相连。
粘末端变成平末端有两种方法：klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平。
为了减少载体自连，可以用碱性磷酸酶处理载体。
最后将载体和目的基因链接，构建重组质粒。
2.
设计引物，自带酶切位点，扩增目的基因，直接改变目的基因的酶切位点，然后再用和载体相同的限制酶酶切目的基因，切出相同的粘性末端。
直接将酶切完成的目的基因和载体连接。
到此，以上就是小编对于如何选择限制性内切酶?的问题就介绍到这了，希望介绍的3点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
